Hvad fungerer almindeligvis som en DNA-kloningsvektor?
Hvad fungerer almindeligvis som en DNA-kloningsvektor?

Video: Hvad fungerer almindeligvis som en DNA-kloningsvektor?

Video: Hvad fungerer almindeligvis som en DNA-kloningsvektor?
Video: Hvad er chancen for at få de 10 juletræer? 2024, November
Anonim

Der er mange typer kloningsvektorer , men mest almindeligt brugte er gensplejsede plasmider. Kloning er generelt først udført ved hjælp af Escherichia coli, og kloningsvektorer i E. coli indbefatter plasmider, bakteriofager (såsom fag λ), cosmider og bakterielle kunstige kromosomer (BAC'er).

Også spurgt, hvad er en vektor i DNA-kloning?

I molekylær kloning , a vektor er en DNA molekyle brugt som vehikel til kunstigt at transportere fremmed genetisk materiale ind i en anden celle, hvor det kan replikeres og/eller udtrykkes (f.eks. plasmid, cosmid, lambda-fager). EN vektor indeholdende fremmed DNA kaldes rekombinant DNA.

Ved også, hvordan man kloner en vektor? Eksperimentel procedure

  1. Kør PCR og oprens PCR-produktet: Kør PCR for at amplificere dit insert-DNA.
  2. Fordøj dit DNA:
  3. Isoler din indsats og vektor ved gelrensning:
  4. Ligate din indsats ind i din vektor:
  5. Transformation:
  6. Isoler det færdige plasmid:
  7. Bekræft dit plasmid ved at sekventere:

Hvordan virker pBR322 i denne henseende som en kloningsvektor?

pBR322 Plasmid pBR322 var et af de første plasmider, der blev brugt til formålet kloning . Det indeholder gener for resistens over for tetracyclin og ampicillin. Indsættelse af DNA'et på specifikke restriktionssteder kan inaktivere genet for tetracyclin (en effekt kendt som en insertionsinaktivering) eller ampicillinresistens.

Hvilken teknik gør det muligt at lave mange kopier af en bestemt del af DNA meget hurtigt?

Polymerase kædereaktion

Anbefalede: