Hvordan fungerer et konfokalt laser-scanningsmikroskop?

2024 Forfatter: Miles Stephen | [email protected]. Sidst ændret: 2023-12-15 23:34

CLSM arbejder ved at bestå en laser stråle gennem en lyskildeblænde, som derefter fokuseres af en objektivlinse ind i et lille område på overfladen af din prøve, og et billede opbygges pixel-for-pixel ved at indsamle de udsendte fotoner fra fluoroforerne i prøven.

Hvordan fungerer det konfokale mikroskop tilsvarende?

Konfokale mikroskoper virker på princippet om punktexcitation i prøven (diffraktionsbegrænset plet) og punktdetektion af det resulterende fluorescerende signal. Et nålehul ved detektoren giver en fysisk barriere, der blokerer ufokuseret fluorescens.

For det andet, hvad er forstørrelsen af et laserscanningskonfokalmikroskop? Dette førstegenerationsinstrument afbilder hornhindestrukturer ved ×400 forstørrelse og har et synsfelt på 400 × 400 µm, når det bruges med et ×63 objektiv med en numerisk blænde på 0,9. Den bruger en 670 nm rød bølgelængde Helium-Neon diode laser som dens belysningskilde.

Ved også, hvad observerer laserscanningskonfokale mikroskoper?

Konfokal laser scanningsmikroskopi (CLSM) tillader optisk udskæring gennem væv. Ved at eliminere ufokuserede billeder giver CLSM større rumlig opløsning i levende væv og tillader visualisering af levende strukturer så små som dendritiske rygsøjler (fig. 18.7).

Hvad er den maksimale opløsning for et konfokalt lasermikroskop?

I praksis er maksimal opløsning i Z (aksial), der kan realiseres i en konfokalt mikroskop systemet er ca. 0,8 µm; 2-3 gange værre end i xy-dimensionen.