Indholdsfortegnelse:

Hvordan finder man koncentrationen af DNA ud fra absorbans?
Hvordan finder man koncentrationen af DNA ud fra absorbans?

Video: Hvordan finder man koncentrationen af DNA ud fra absorbans?

Video: Hvordan finder man koncentrationen af DNA ud fra absorbans?
Video: Hvad er epigenetik? - Carlos Guerrero-Bosagna 2024, April
Anonim

DNA koncentration estimeres ved at måle absorbans ved 260nm, justere A260 måling for turbiditet (målt ved absorbans ved 320 nm), multipliceret med fortyndingsfaktoren og brug af forholdet, som en A260 på 1,0 = 50 µg/ml rent dsDNA.

Ligeledes spørger folk, hvordan finder man koncentrationen af DNA?

For at bestemme koncentrationen af DNA i den originale prøve skal du udføre følgende beregning:

  1. dsDNA-koncentration = 50 μg/mL × OD260 × fortyndingsfaktor.
  2. dsDNA-koncentration = 50 μg/ml × 0,65 × 50.
  3. dsDNA-koncentration = 1,63 mg/ml.

Og hvad er en god DNA-koncentration? EN godt kvalitet DNA prøven skal have et A260/EN280 forhold på 1,7-2,0 og en A260/EN230 forhold på mere end 1,5, men da følsomheden af forskellige teknikker over for disse forurenende stoffer varierer, bør disse værdier kun tages som vejledende for renheden af din prøve.

Absorberer DNA på denne måde ved 280 nm?

Absorbansforholdet ved 260 nm vs 280 nm er almindeligvis brugt til at vurdere DNA kontaminering af proteinopløsninger, da proteiner (især de aromatiske aminosyrer) absorbere lys kl 280 nm.

Hvordan bruger du NanoDrop til DNA-koncentration?

Dybest set nanodrop giver dig mulighed for at vælge DNA RNA, Proteiner. Du skal vælge DNA , anbring derefter 2 ΜL vand (mili Q foretrukket) vælg "Blank" efter det placer yderligere 2 ΜL vand for at bekræfte, at målet er 0. Anbring derefter 2 ΜL af din prøve. Du får målingen.

Anbefalede: