Hvorfor skal spektrofotometeret indstilles til en bestemt bølgelængde?
Hvorfor skal spektrofotometeret indstilles til en bestemt bølgelængde?

Video: Hvorfor skal spektrofotometeret indstilles til en bestemt bølgelængde?

Video: Hvorfor skal spektrofotometeret indstilles til en bestemt bølgelængde?
Video: Spectrophotometer: Wavelengths 2024, November
Anonim

Når du justerer bølgelængde på en spektrofotometer , dig er at ændre positionen af prismet eller diffraktionsgitteret, så det er forskelligt bølgelængder af lys er rettet mod slidsen. Jo mindre spaltebredden er, jo bedre er instrumentets evne til at opløse forskellige forbindelser.

Heraf, ved hvilken bølgelængde vil spektrofotometeret blive indstillet?

Afhængigt af lyskildens bølgelængdeområde kan det klassificeres i to forskellige typer: UV-synligt spektrofotometer: bruger lys over det ultraviolette område (185 - 400 nm) og det synlige område (400 - 700 nm ) af elektromagnetisk strålingsspektrum.

Ligeledes, hvorfor skal du kalibrere spektrometeret, hver gang du ændrer bølgelængden? Spektrofotometer skal være kalibreret mod en blank opløsning så at målinger efter det kan bruge blindopløsningens absorbans som nulreference. Et mål for et stofs evne til at absorbere lys af en specificeret bølgelængde.

ved hvilken bølgelængde skal aflæsningerne tages?

Tage aflæsninger med 5 nm intervaller lidt før og efter dette bølgelængde . For eksempel, hvis den maksimale absorbans blev fundet ved 450 nm, så for at få en mere nøjagtig læsning af λmax, tage absorbans aflæsninger ved 440, 445, 455 og 460 nm.

Hvorfor måler du opløsningens absorbans ved 550 nm?

Proteiner reagerer med kobberioner i alkalisk løsning at danne et violetfarvet kompleks, der absorberer lys kl 550 nm . Derfor ved måling koncentrationen af komplekset ved hjælp af A550 ( Absorbans på 550 nm ), du er også måling koncentrationen af protein.

Anbefalede: