Indholdsfortegnelse:

Hvordan indlæser man gelelektroforese?
Hvordan indlæser man gelelektroforese?

Video: Hvordan indlæser man gelelektroforese?

Video: Hvordan indlæser man gelelektroforese?
Video: Loading an Agarose Gel 2024, November
Anonim

Indlæsning af prøver og kørsel af en agarosegel:

  1. Tilføje Indlæser buffer til hver af dine DNA-prøver.
  2. Når den er størknet, placeres agarosen gel ind i gel kasse ( elektroforese enhed).
  3. Fylde gel kasse med 1xTAE (eller TBE) indtil den gel er dækket.
  4. Forsigtigt belastning en molekylvægtstige ind i den første bane af gel .

I forhold til dette, hvor meget DNA skal du indlæse for gelelektroforese?

Mængden af DNA at indlæse pr. brønd er variabel. Den mindste mængde af DNA der kan påvises med ethidumbromid er 10 ng. DNA mængder på op til 100 ng pr. brønd vil resultere i et skarpt, rent bånd på et ethidiumbromidfarvet gel.

Derudover, hvorfor bruges buffer i gelelektroforese i stedet for vand? Det buffer er nødvendig for at holde pH i DNA-opløsningen tæt på neutralt niveau, fordi hvis det kan blive surt gennem elektrolyse. De elektriske strømme forårsaget af elektroderne kan forårsage vand molekyler til at dissociere og frigive H+ ioner.

Folk spørger også, hvorfor bruges en markør i gelelektroforese?

Mindre fragmenter bevæger sig hurtigere, og derfor længere, end større fragmenter, når de slanger sig igennem gel . Hvorfor bruges en markør når du kører fragmenterne igennem gel ? EN markør indeholder DNA-fragmenter af kendt størrelse. Markører køres i hver gel til sammenligning med de ukendte fragmenter i andre gel baner.

Hvor meget DNA kan ses på en agarosegel?

Mest agarose geler er lavet mellem 0,7% og 2%. 0,7 % gel vil vise god adskillelse (opløsning) af store DNA fragmenter (5-10 kb) og en 2 % gel vil viser god opløsning for små fragmenter (0,2-1 kb).

Anbefalede: