Hvorfor anvendes nitrocellulosemembran i Southern blotting?
Hvorfor anvendes nitrocellulosemembran i Southern blotting?

Video: Hvorfor anvendes nitrocellulosemembran i Southern blotting?

Video: Hvorfor anvendes nitrocellulosemembran i Southern blotting?
Video: Hvad er "stall", og hvorfor anvendes aktive kondensatpumper i vekslerapplikationer? 2024, Kan
Anonim

I den originale protokol nitrocellulose membran har været Brugt for blotting i tilfælde af Southern blot men i nyere tid nylon membraner er blevet implementeret for blotting proces på grund af deres evne til at binde mere mængde DNA effektivt, hvilket tillader Southern blot skal udføres med mindre mængde

Derfor, hvorfor anvendes nitrocellulosemembran til blotting?

Nitrocellulose membraner er en populær matrix Brugt i protein blotting på grund af deres høje proteinbindingsaffinitet, kompatibilitet med en række forskellige detektionsmetoder (kemiluminescens, kromogene og fluorescens) og evnen til at immobilisere proteiner, glycoproteiner eller nukleinsyrer.

Og hvorfor overføres DNA til en nylonmembran? Ved at bruge 0,4 M NaOH som overførsel opløsningsmiddel efter en kort forbehandling af gelen i syre, DNA er depurineret under overførsel . Eksponering af DNA til ultraviolet lys, enten i gelen eller efterfølgende overførsel til nylon membran , reducerer dets evne til at hybridisere.

Derudover, hvad er formålet med Southern blotting?

EN Southern blot er en metode, der anvendes i molekylærbiologi til påvisning af en specifik DNA-sekvens i DNA-prøver. Southern blotting kombinerer overførsel af elektroforese-separerede DNA-fragmenter til en filtermembran og efterfølgende fragmentdetektion ved probehybridisering.

Hvordan hjælper Southern blotting i retsmedicinske undersøgelser?

EN Southern blot , opkaldt efter dens opfinder Edwin Syd , er en metode, der bruges til at kontrollere tilstedeværelsen af en specifik DNA-sekvens i en DNA-prøve. Når først et individs DNA er fordøjet med et specifikt restriktionsenzym, analyseres de resulterende fragmenter af Southern blot analyse.

Anbefalede: